4D Cell-Imaging
Beschreibung
4D Cell-Imaging ermöglicht das direkte Verfolgen der Trockenmasse-Produktionsrate sowie das Erfassen der Dichte der Trockenmasse an der Oberfläche von Wildtypen und mutierten Hefezellen. Zusammengefasst erlaubt das DHM® die labelfreie, quantitative Analyse des Zellzyklus.
Material und Methoden
- Zellen: S. pombe herangezogen gemäss Standard Methoden in Y5 Komplettmedium in früher log-Phase
- DHM® Lösung: Quantitative-Phasenmikroskopie (QPM) mit dem DHM-T1000
- Methode: DHM® für QPM Daten und Barer Law für Trockenmasse-Produktionsrate und Trockenmasse-Oberflächendichte-Messung.
Resultate
Die Quantitative-Phasenmikroskopie-Lösung (QPM) mit dem DHM® erlaubt das Studium der Trockenmasse-Produktionsrate sowie der Trockenmasse-Oberflächendichte durch den Zellzyklus von Wildtyp und mutierenden Hefezellen auf Einzelzell-Level in nicht-invasiver Art. Es zeigt sich, das die Trockenmasse-Produktionsrate des Mutanten und des Wildtyps signifikant unterschiedlich ist. Ebenso, dass die Wildtyp-Oberflächendichte ein bestimmtes Muster zeigt, herrührend vom Cytokinesis Prozess, welches der Mutant nicht zeigt. Das Beobachten der Trockenmasse-Produktion mit dem DHM® kann einfach kombiniert werden mit dem Beobachten weiterer Parameter, z.B. das Volumen und der Brechungsindex, zum besseren Verständnis des Zellzyklus.
Publikation
Beschreibung
Quantitative-Phasenmikroskopie-Messung (QPM) mit dem DHM® wird zur Zellerkennung und Analyse eingesetzt. Eine praktische Anwendung wird hier an Pollen gezeigt.
Material und Methoden
- Zellen: Pollen Samples, in der Grösse von 20 μm bis 30 μm für drei verschiedene Pollentypen: Birke, Eibe und Löwenzahn
- DHM® Lösung: Quantitative-Phasenmikroskopie (QPM)
- Methode: QPM Daten aufgenommen mit dem DHM-T1000. Klassifizierung über direkte Messung und adaptive Algorithmen angewandt auf QPM Daten
Resultate
Die Eignung der QPM Methode für Zellanalyse & Erkennung wird bewiesen mit der Identifikation von Pollenzellen. Sie ist auch auf andere Zelltypen anwendbar, auf sowohl pflanzliche wie auch animalische.
